Среда "ГибриС-2"
Среда
1 180,00 RUB
Купить


Агар бактериологичнский
Агар бактериологичнский
1 725,00 RUB
Купить


Раствор Хенкса с феноловым красным
Раствор Хенкса с феноловым красным
207,90 RUB
Купить


Чашки Петри 60х15 мм, стер.
Чашки Петри 60х15 мм, стер.
570,70 RUB
Купить


Среда MEM с сол. Эрла, с глут., без незам. АК, без бикарб. Na
Среда MEM с сол. Эрла, с глут., без незам. АК, без бикарб. Na
1 845,00 RUB
Купить


Главная arrow Питательные среды и реагенты для культур клеток arrow Питательные среды arrow Бессывороточные среды arrow Бессывороточные среды производства НПП "ПанЭко" arrow Среда "ГибриС-1-293"


Среда "ГибриС-1-293"

Производитель: ПанЭко

Артикул: С730п

Фасовка: 450 мл

 

Среда "ГибриС-1-293"
Увеличить

Цена: 1 180,00 RUB

 



Бессывороточная, безбелковая питательная среда Гибрис-1-293 (для суспензионной культуры клеток НЕК-293) представляет собой растворенную в деионизованной воде смесь неорганических солей, аминокислот, витаминов, глюкозы и синтетических заменителей сыворотки, простерилизованную фильтрованием через фильтры с размером пор 0,22 мкм.

Среда Гибрис-1-293 характеризуются химически определенным составом компонентов и не содержат продуктов гидролиза белков животной или растительной природы в качестве обогатителей.

Назначение и свойства

Среда «Гибрис-1-293», предназначена для высокоэффективного суспензионного культивирования клеток рекомбинантных клонов и линий НЕК 293 в биотехнологических процессах.

Среда простерилизована фильтрованием через фильтр с диаметром пор 0.22 мкм. Внешний вид: прозрачная жидкость, желтого цвета (модификация без фенолового красного) или желто-оранжевого цвета (модификация с феноловым красным), без опалесценции и осадка. рН от 7.2 до 7.4.

 Форма выпуска: Препарат выпускают в пластиковых флаконах (450±5,0 мл). Препарат - прозрачная жидкость, желтого цвета, без опалесценции и осадка, рН от 7,2 до 7,4.

Срок годности: 1 год. 

Условия хранения и транспортировки: хранить при температуре 2 - 8°С в защищенном от света месте. 

Способ применения 

  • Вскрыть флакон в асептических условиях.
  • Разлить подготовленную среду в культуральные емкости или системы биореакторного культивирования.
  • Сеять клетки с плотностью 3 - 6 x 105 клеток/мл.

 

Примечание: с целью достижения высоких плотностей суспензионных культур клеток НЕК-293, а также продуктивности и качества рекомбинантных белков в биотехнологических процессах предполагается использование специальных подпиток (Feeds). Качественный и количественный состав подпиток определяется клиентом, исходя из особенностей конкретного процесса.

Показатели роста культуры HEK 293 T (ООО «ПанЭко»), в среде «Гибрис-1-293» в условиях модельного биореакторного культивирования.

Лабораторная установка: шейкер для СО2-инкубатора Celltron (Infors, Швейцария) с использованием колб Эрленмейера объемом 100 – 125 мл (рабочий объем среды – 25 – 30 мл) или биореакторных флаконов ООО «ПанЭко» объемом 75 мл (рабочий объем среды – 10 – 12 мл), скорость перемешивания 115 - 130 об./мин; 37 оС, 5 – 6% СО2.

Посевная культура: HEK 239 T (ООО «ПанЭко»), выращенная до плотности 4 – 5 х 106 клеток/мл в перемешиваемой культуре (колба, биореакторный флакон). Начальная плотность культуры в пассаже 2.5 – 6 х 105 клеток/мл.

Оценка результатов теста: оценка эффективности культивирования клеток производилась, начиная с 72 часов после посева. Для подсчета живых клеток суспензия клеток окрашивалась раствором трипанового синего. 

Достижение максимума плотности по количеству живых клеток в условиях стационарной культуры без подпиток (batch culture) в среде «Гибрис-1-293» происходило на 4 – 6 сутки от начала культивирования в зависимости от плотности посева. Для линии HEK 293 T (ООО «ПанЭко») при посевной плотности 4 х 105 клеток/мл и с добавкой в среду L-аланил-L-глутамина в конечной концентрации 1600 мг/л максимум плотности наблюдался на 5 день и составлял 4.7 – 6.3 х 106 клеток/мл (n=10) (рис. 1А). Среднее время удвоения 32 – 38 часов. При максимальной плотности клетки практически не образовывали агрегатов. 

gibrisgrafik.jpg

 Показатели роста суспензионной культуры HEK 293 T в среде «ГибриС-1-293» с добавкой L-аланил-L-глутамина (конечная концентрация 1600 мг/л). Клетки культивировались в биореакторных флаконах ООО «ПанЭко» объемом 75 мл. Рабочий объем среды – 10 мл, скорость перемешивания 130 об./мин; 37 оС, 5% СО2. А. Кинетика роста культуры в течение 7 дней. Культивирование и подсчет клеток велись одновременно в 10 флаконах. Посевная плотность – 4 х 105 клеток/мл. На графике показаны средние плотности клеток ± стандартные отклонения (n=10). Б. Пример изменения плотности культуры HEK 293 T в течение 37 дней (8 пассажей) при посевной плотности 2 – 6 x 105 клеток/мл и пассировании каждые 4 – 5 дней. В этих условиях к моменту пассирования плотность культуры увеличивалась в среднем в 10.5 ± 2.4 раз.

 В проведенном тестировании показано, что среда «ГибриС-1-293» позволяет поддерживать индекс пролиферации культуры HEK 293 T на уровне 8 – 13 в течение, как минимум, 8 пассажей длительностью 4 – 5 дней каждый при посевной плотности 2 – 6 x 105 клеток/мл (рис. 1Б). 

 


 



Top!
Top!
0.5455