Агар Сабуро
Агар Сабуро
814,00 RUB
Купить


Колба Эрленмейера 250 мл
Колба Эрленмейера 250 мл
568,75 RUB
Купить


Наконечники до 1000 мкл, нестер.
Наконечники до 1000 мкл, нестер.
880,00 RUB
Купить


Среда "ПерСелект", 45%
Среда
4 620,00 RUB
Купить


Иммерсионная смесь 518N
Иммерсионная смесь 518N
4 000,00 RUB
Купить


Главная arrow Питательные среды и реагенты для культур клеток arrow Питательные среды arrow Бессывороточные среды arrow Бессывороточные среды производства НПП "ПанЭко" arrow Среда "ГибриС-8"


Среда "ГибриС-8"

Производитель: ПанЭко

Артикул: С781П

Фасовка: 100 мл

 

Среда "ГибриС-8"
Увеличить

Цена: 4 004,00 RUB

 



Бессывороточная среда ГибриС-8 100 мл
с добавкой 2 мл.

Среда ГибриС-8 – это бессывороточная среда для культивирования индуцированных плюрипотентных стволовых клеток (iPSC) и эмбриональных стволовых клеток (ES) без использования фидерного слоя. Среда содержит минимальный набор компонентов, необходимых для выживания, пролиферации и поддержания недифференцированного плюрипотентного состояния стволовых клеток в течение длительной серии пассажей. В состав ГибриС-8 не входят альбумин, фетуин и компоненты неопределенного состава (например, гидролизаты растатительных или животных белков).

Данный продукт предназначен для исследовательских целей.  

Состав среды

Полная среда ГибриС-8 представляет собой смесь минеральных солей, аминокислот, глюкозы, витаминов, антиоксидантов и рекомбинантных человеческих белков, растворенную в деионизованной воде.

Среда содержит pH-индикатор - феноловый красный.

Способ применения

Приготовление полной среды ГибриС-8:

1. Вскрыть флакон со средой в асептических условиях.
2. Внести в среду Добавку к среде ГибриС-8 (50x), разбавив ее в отношении 1:50.
3. Внести в среду L-Глутамин в конечной концентрации 365 мг/л.
4. Внести в среду антибиотики (при необходимости).

Хранить полную среду при +2 - +8°C в течение не более 2-х недель. 

Хранить среду при температуре от +2 до +8 оС.

Хранить добавку при температуре от -15 до -20 оС. 

Срок годности: 1 год. 

Общие рекомендации по культивированию iPSC в Гибрис-8

ГирбиС-8 позволяет культивировать стволовые клетки на различных коммерчески доступных белковых покрытиях для культурального пластика: экстракт белков внеклеточного матрикса из саркомы Энгельберта-Холма-Сворма (например, Corning Matrigel) или рекомбинантный человеческий витронектин.

Стволовые клетки, культивируемые в ГибриС-8, можно пассировать без контакта с сывороткой, используя трипсин и ингибитор трипсина из соевых бобов. Помимо этого, для пассирования можно использовать безферментный протокол, основанный на обработке клеток раствором Версена.

Для длительного рутинного культивирования в среде ГибриС-8 мы рекомендуем пассировать стволовые клетки небольшими агрегатами (диаметром 50 – 200 мкм), когда их колонии покрывают 60 – 70% доступной площади или когда в культуре вырастают очень крупные колонии с многослойной структурой в центре. Оптимальное количество дней между пассажами варьирует от 3 до 8. В соответствии с желаемым графиком ведения культуры рекомендуется разбавлять суспензию клеток при пассировании в отношениях от 1:3 до 1:12. Допускается появление в культуре небольшого количество дифференцированных клеток, которые не требуют удаления. Необходимо менять среду каждый день.

ГибриС-8 также поддерживает рост культур стволовых клеток в течение 2 – 3 пассажей при пассировании одиночными клетками с добавлением в среду на 1 – 2 сутки ингибитора протеинкиназ типа ROCK (Y-27632). Однако в этом случае существенно возрастает вероятность дифференцировки всех или большинства клеток, нарушений в кариотипе и снижения интенсивности пролиферации и выживаемости клеток.

Результаты тестирования среды ГибриС-8 в условиях модельного эксперимента

Для тестирования среды ГибриС-8 мы использовали культуру iPSC. Клетки культивировались в T25-флаконах, покрытых Corning Matrigel, при 5% CO2, 37°C и 95% влажности. Клетки пересевались агрегатами каждые 7 – 8 дней. При пересеве суспензия клеток разбавлялась в отношении 1:10. Нами было показано, что ГибриС-8 поддерживает пролиферацию iPSC в течение минимум 8 пассажей. При этом за 7 – 8 дней после посева площади исходных колоний iPSC (наблюдаемые через 24 часа после посева) увеличивались в 10 – 50 раз. В ходе тестирования мы не наблюдали признаков дифференцировки клеток.

Ниже представлены микрофотографии (увеличение – 10x) одного и того же участка культурального флакона на 3, 4 и 7 сутки.

gibris-8exp.jpg

 



 



Вас, возможно, заинтересуют следующие товары:

Глутамин, стерильный 146 мг
Глутамин, стерильный 146 мг
66,00 RUB
Купить
Раствор Версена
Раствор Версена
202,60 RUB
Купить

Top!
Top!
0.6033