Среда «ЭКО1 "Универсальная"» с альбумином, без антибиотиков, 10 мл

Среда «ЭКО1 "Универсальная"» с альбумином, без антибиотиков, 10 мл

Питательная среда ЭКО1 по ТУ 9385-013-45171785-2010 с жидким парафиновым маслом в следующих вариантах исполнения: "Аспирационная"; "Ооклин"; "Универсальная"; "Спермопреп"; "ИКСИ"; "ПВП"; "Гиаза"; "Кислый раствор Тироде"

Представляет собой раствор на основе бикарбонатного буфера, содержащий соли Эрла, глюкозу, лактат, пируват, аминокислоты и человеческий сывороточный альбумин, протестированный на наличие поверхностного антигена вируса гепатита В, антител к вирусам гепатита С, ВИЧ-1, ВИЧ-2 и возбудителю сифилиса. Простеризована методом мембранной фильтрации с размером пор 0,22 мкм. 

По желанию заказчика среда может быть приготовлена с антибиотиками, а также без красителя феноволого красного.

Препарат: Прозрачная жидкость красновато-оранжевого цвета без опалесценции и осадка.

Назначение: Среда предназначена для проведения фертилизации, может использоваться для кратковременного культивирования эмбрионов на ранней стадии развития и проведения процедуры ИКСИ. Применяется во вспомогательных репродуктивных технологиях в лечебно-профилактических и научно-исследовательских учреждениях. 

Способ применения: 

Для проведения фертилизации и кратковременного культивирования эмбрионов

1. Вскрытие флакона должно производиться в стерильных условиях;
   
   

2. Перед использованием приоткрытый флакон со средой выдерживать в атмосфере 5–6% СО₂ при температуре 37 °С в течение 2 ч. Для успешного проведения фертилизации требуется использовать сперматозоиды в оптимальной концентрации: 80 000–100 000 подвижных сперматозоидов в 1 мл среды;
   
   

3. Ооцит-кумулюсные комплексы после отмывки в среде ЭКО1 "Ооклин" поместить в среду ЭКО1 "Универсальная" и инкубировать в ней в течение 3–4 ч;
   
   

4. По истечении этого времени в капли со средой, в которых содержатся ооцит-кумулюсные комплексы, внести рассчитанный объём отмытых сперматозоидов до конечной концентрации 80 000–100 000 подвижных сперматозоидов в 1 мл среды;
   
   

5. Сразу после внесения сперматозоидов планшет перенести в СО₂-инкубатор;
   
   

6. Через 16–20 ч. ооциты осторожно промыть, перенося через несколько капель с уравновешенной средой ЭКО1 "Универсальная";
   
   

7. Проверить формирование пронуклеусов в зиготах, после чего корректно сформировавшиеся зиготы осторожно промыть и перенести в среду для культивирования эмбрионов (ЭКО ПРО "Дробление" или в новую порцию среды ЭКО 1 "Универсальная");
   
   

8. Культивирование в среде ЭКО1 "Универсальная" можно проводить до стадии двух бластомеров, затем эмбрионы следует поместить в среду для последующего культивирования до стадии 4–8 бластомеров (ЭКО ПРО "Дробление");
   
   

9. Фертилизацию и культивирование можно проводить в микрокаплях среды, покрытых жидким парафиновым маслом, либо в лунках со средой объёмом 500 мкл без покрытия среды маслом.

Для использования среды при проведении процедуры ИКСИ

1. Вскрытие флакона должно производиться в стерильных условиях;

2. Перед использованием приоткрытый флакон со средой выдерживать в атмосфере 5–6% СО2 при температуре 37 °С в течение 2 ч.

3. Ооцит-кумулюсные комплексы после отмывки в среде ЭКО1 "Ооклин" поместить в среду ЭКО1 "Универсальная". Инкубация в среде ЭКО1 "Универсальная" должна проводиться в течение 3–4 ч;
   
   

4. Провести освобождение ооцитов от кумулюсных клеток с помощью кратковременного выдерживания в среде ЭКО1 "Гиаза" и последующей денудации ооцитов в среде ЭКО 1 "Универсальная";
   
   

5. После проведения денудации и перед проведением инъекции сперматозоида ооциты должны быть выдержаны в СО₂-инкубаторе в среде ЭКО1 "Универсальная" в течение небольшого промежутка времени;
   
   

6. Процедуру инъекции сперматозоида проводить в чашках Петри. В середину чашки внести каплю среды ЭКО1 "ПВП", в эту же чашку поместить капли среды ЭКО1 "Универсальная", в которой будут проводиться инъекции. Количество этих капель соответствует количеству ооцитов;
   
   

7. Все капли должны быть покрыты слоем жидкого парафинового масла, предварительно выдержанного в атмосфере 5–6% СО₂ при температуре 37 °С в течение 12 ч;
   
   

8. Чашку с покрытыми маслом каплями среды рекомендуется оставить на некоторое время в СО₂-инкубаторе, чтобы рН среды и температура вернулись к необходимым значениям;
   
   

9. Подготовленные сперматозоиды поместить в центральную каплю. В периферические капли внести ооциты;
   
   

10. Провести фиксацию одного сперматозоида с помощью инъекционной микропипетки. Инъекцию сперматозоида рекомендуется проводить в минимальном объёме среды ЭКО1 "ПВП";
    
    

11. Провести фиксацию ооцита с помощью холдинг-пипетки. Важно зафиксировать ооцит таким образом, чтобы полярное тельце находилось в позиции на 6 или на 12 ч;
    
    

12. Инъекционную микропипетку вводят в ооцит в положении на 3 ч. Для подтверждения прокола блестящей оболочки рекомендуется аспирировать часть цитоплазмы;
    
    

13. Если пипетка проникла внутрь цитоплазмы, то сперматозоид с частью аспирированной цитоплазмы ввести внутрь ооцита. После введения сперматозоида подать давление в холдинг-пипетке и ооцит отсоединится;
    
    

14. Промыть ооциты и инкубировать их в уравновешенной среде ЭКО ПРО "Дробление" или ЭКО1 "Универсальная";
    
    

15. С момента инъекции должно пройти 16–18 ч., после чего необходимо проверить формирование пронуклеусов в ооцитах;
    
    

16. Дальнейшее культивирование проводить в тех же средах. Культивирование можно осуществлять до стадии двух бластомеров в среде ЭКО1 "Универсальная", затем эмбрионы следует поместить в среду ЭКО ПРО "Дробление" для последующего культивирования до стадии 4–8 бластомеров, либо перенести в полость матки для имплантации в среде ЭКО ПРО "Швартовая".

Неиспользованный остаток нагретой среды не подлежит повторному нагреванию и исполь­зованию. После вскрытия препарат следует использовать в течение 7 дней.

Условия хранения: Хранить при температуре +2…+8 °C в защищённом от света месте с минимальным объёмом воздуха во флаконе. Транспортировать в тех же условиях всеми  видами крытого транспорта. Не замораживать!

Данный продукт имеет Регистрационное Удостоверение