Top.Mail.Ru
0
Корзина 0,00 руб.

Среда КриоМед-П на основе ДМСО, 60 мл

Производитель: ПанЭко
Кат. №: С881-П
Остаток на складе:
Уточняйте у менеджера
1 669,20 руб.
0,00
руб.
Ставка НДС: 20%
Описание

Среда КриоМед-П

Предназначена для суспензионного замораживания и хранения культивируемых клеток. Не содержит сыворотки и органических компонентов неопределенного состава. Имеет сбалансированный ионный состав.

Данный продукт предназначен для исследовательских целей

Инструкция по применению

  1. Взять культуру с плотностью монослоя 70-80% (для клеток прикрепляемых культур), или 50-70% плотности суспензии (для клеток суспензионных культур).
  2. Снять клетки прикрепляемых культур с субстрата при помощи диссоциирующего раствора Трипсин-ЭДТА 0,05% в течение 5 минут при 37оС (предварительно ополоснуть монослой клеток изотоническим раствором, не содержащим ионов Ca2+и Mg2+). Клетки суспензионных культур пипетировать и собрать в центрифужной пробирке.
  3. Инактивировать трипсин при помощи: среды, содержащей 2-10% сыворотки (для сывороточных культур) или рабочего раствора ингибитора трипсина из плодов сои (0,2 мг/мл) – (для бессывороточных или сывороточных культур).
  4. Осадить клетки, центрифугируя при 1000 об/мин 5-7 минут. Удалить супернатант, не затрагивая клеточный осадок.
  5. Ресуспендировать клетки в среде «КриоМед-П» из расчета 0,5-2,0 млн/мл.
  6. Разлить приготовленную криосуспензию по криопробиркам, герметично укупорить замораживаемые образцы.
  7. Поместить замораживаемые образцы в специальный криоконтейнер с крышкой, можно в бокс из пенопласта и поместить его для медленного охлаждения в морозильник (-20 °С) в течение 1 часа.
  8. Перенести бокс с образцами в морозильник глубокой заморозки (-70 °С) на 8-12 часов.
  9. Быстро перенести образцы в жидкий азот (-197 °С) для длительного хранения.

Размораживание клеток:

  1. Полностью разморозить содержимое криопробирок при 37 °С.
  2. Мягко ресуспендировать клетки и однократно отмыть в среде культивирования или изотоническом растворе (1мл криообразца на 4мл среды, раствора), центрифугировать при 1000 об/мин 5-7 минут.
  3. Ресуспендировать клетки в среде культивирования и посадить в культуральном флаконе 25 см2.
  4. При необходимости, перед пассажем оценивают количество жизнеспособных клеток в посевном материале при помощи окрашивания трипановым-синим.
  5. Для максимального удаления ДМСО рекомендуется произвести полную замену среды через 1 сутки после начала культивирования клеток.
  6. При работе с крупными, дифференцированными или чувствительными к механическим воздействиям клетками, этап отмывки может быть опущен. Однако, необходима полная замена среды через 1 сутки.

Срок годности:1 год

Условия хранения и транспортировки:

Хранить при температуре 2 - 8 °С в защищенном от света месте.

Транспортировать всеми видами крытого транспорта при температуре 2- 8 °С.

Характеристики
  • Стерильность: +
  • Документы: Для исследовательских целей
  • Упаковка: 60 мл
0
0